Question

【題目】I以富含纖維素的作物秸稈為原料、利用微生物發酵生產乙醇，是現代化石能源的重要途徑。科學家通過實驗篩選出分解纖維素能力較強的菌株，實驗流程如下。

請回答:

（1）樣品最好取自于______的土壤。

（2）篩選過程中，可以采用______染色法進行鑒定，其中______的菌落中的菌種分解纖維素能力較強。

（3）培養基b應為______（固體、液體）培養基。擴大培養后，可采用______的方法進行計數。

（4）得到的目的菌種，一般用______法進行固定，常用的多孔性載體有______（寫出1種即可）。在工業生產中使用固定化菌種的優點是____________（寫出2點即可）。

Ⅱ腫瘤細胞的蛋白PD-L1能夠與T細胞的蛋白PD-1結合，抑制免疫系統對腫瘤的殺傷作用。某種靶向藥物可以阻斷上述結合過程，從而增強免疫系統對腫瘤的殺傷作用。下圖是制備該藥物的流程圖：

請據圖回答：

（1）以______作為抗原注入小鼠體內，發生免疫反應后，從小鼠體內的______（器官）中提取細胞a。

（2）細胞a與b能融合的原理是______，常用的誘導方法有______（寫出2個即可）。經過誘導，兩兩融合的細胞有______類。

（3）細胞d的特點是：____________。可將細胞d通過______或______進行大規模培養。

（4）鑒定提取物中是否含有該靶向藥物時，可取適量提取物，加入______，觀察是否出現凝集沉淀。

Answer 1

【答案】富含纖維素 剛果紅 透明圈直徑越大 液體 顯微鏡直接計數 包埋 海藻酸鈉 可以重復使用，減少投資（穩定性強、操作簡便、發酵速度快、生產周期短、酒精得率高） PD-L1（或蛋白PD-L1） 脾 細胞膜具有流動性 聚乙二醇、滅活的病毒、電激等 3 既能迅速大量繁殖，又能產生專一的抗體 體外培養 注入小鼠腹腔 PD-L1（或蛋白PD-L1）

【解析】

I本題考查纖維素分解菌的分離和培養,要求考生識記分離分解纖維素的微生物的原理,掌握固定化術及優點,能結合所學的知識準確題；Ⅱ本題主要考查人體免疫系統在維持穩態中的作用以及單克隆抗體制備過程,意在考查學生對基礎知識的理解掌握,難度適中。據圖分析,細胞a是經過抗原免疫的B淋巴細胞,細胞b是骨髓瘤細胞,篩選1是通過篩選得到雜交瘤細胞c(去掉未雜交的細胞以及自身融合的細胞),篩選2是選出能夠產生特異性抗體的細胞d,然后進行體外和體內培養,分離提取即可。

I (1)要篩選出分解纖維素能力較強的菌株,樣品最好取自于富含纖維素的土壤。

(2)在培養基中加入剛果紅,可與培養基中的纖維素形成紅色復合物,當纖維素被分解后紅色復合物不能形成,培養基中會出現以纖維素分解菌為中心的透明圈,從而可篩選纖維素分解菌,其中透明圈直徑越大的菌落中的菌種分解纖維素能力較強。

(3)要擴大培養菌種,應該采用液體培養基。擴大培養后,可采用顯微鏡直接計數的方法進行計數。

(4)固定化細胞一般采用包埋法,常用的多孔性載體有海藻酸鈉。在工業生產中使用固定化菌種的優點是:可以重復使用,減少投資、穩定性強、操作簡便、發酵速度快、生產周期短、酒精得率高等。

Ⅱ(1)由圖示可知,以PD-L1作為抗原注入小鼠體內,發生免疫反應后,從小鼠體內的脾臟中提取細胞a。

(2)細胞a與b能融合的原理是細胞膜具有流動性,常用的誘導方法有聚乙二醇、滅活的病毒、電激等。經過誘導,兩兩融合的細胞有3類,即瘤瘤細胞、BB細胞、雜交瘤細胞。

(3)細胞d的特點是:既能無限增殖,又能產生專一抗體。可將細胞d通過體外培養或注入小鼠腹腔進行大規模培養。

(4)鑒定提取物中是否含有該靶向藥物時,可取適量提取物,加入PD-1,觀察是否出現凝集沉淀,若出現凝集沉淀,則說明提取物中含有該靶向藥物。