Question

【題目】回答下列（一）、（二）小題：

（一）菊花組織培養的部分過程如下圖：

（1）過程①利用_______（較高/較低）滲透壓，使原生質體產量大幅度提高，但存活率卻因此而降低，分析降低的原因可能是___________________________。過程②細胞壁形成后，可逐漸__________滲透壓。

（2）幼苗莖段帶葉，就會帶有____________，也就有了分生組織，所以不通過___________階段就可直接形成叢狀苗。過程③應在______________（從具體功能角度）培養基中進行，全過程對光照要求是________。

A．早期每天24h光照，后期每天24h黑暗 B．每天一定時長的光照

C．早期每天24h黑暗，后期每天24h光照 D．每天24h黑暗

（二）科學家將蜘蛛的蛛絲蛋白基因導入山羊體內，得到轉基因山羊，使羊奶中含有一種獨特的蛛絲蛋白，生產原理見下圖。請回答：

（1）將蛛絲蛋白基因和載體通過甲過程形成的X物質為_____________，可用___________法將X導入受體細胞。

（2）為了獲得蛛絲蛋白，圖中的受體細胞應該選擇_________羊（填性別）的體細胞，要使重組細胞具有全能性，乙過程需要的技術操作是______________。

（3）丙過程中，核DNA被重新編排，胚細胞開始表達自己的基因，進而調控胚在代孕母體子宮中進一步發育的原因是_____________________________。

A．該過程所用培養液的成分與乙過程相同
B．該過程需定期用胰酶處理成細胞懸液進行傳代培養
C．該過程為動物細胞培養，目的是獲得更多的重組細胞
D．該過程中供體核DNA上原有的調節蛋白會被卵細胞質中的蛋白因子替換

（4）為了快速繁殖轉基因山羊，可在丁過程前對早期胚胎進行___________，經培養后再分別移植到同期發情處理的____________的代孕母羊的相應部位。

Answer 1

【答案】較高 過度失水損傷/死亡 降低 腋芽/芽 愈傷組織/脫分化 發芽/生芽 B 重組DNA分子 顯微注射 雌 核移植 D 胚胎分割 未經配種

【解析】

（一）圖中①過程為獲得原生質體的過程，②過程為再生細胞壁的過程，新細胞經過植物組織培養可獲得新植株。③過程是用帶葉的菊花幼苗莖切斷直接培養形成叢狀苗，然后叢狀苗再形成新植株。

（二）分析題圖，甲表示構建基因表達載體，X表示重組DNA分子；乙表示核移植技術；丙表示動物細胞培養或早期胚胎培養；丁表示胚胎移植。

（一）（1）過程①是制備原生質體的過程，為防止原生質體吸水膨脹破裂，利用較高滲透壓溶液，使原生質體產量大幅度提高，但存活率卻因此而降低，其降低的原因可能是過度失水損傷或死亡，過程②細胞壁形成后，可逐漸降低細胞外液滲透壓，這樣細胞即使吸水，也不會漲破。

（2）幼苗莖段帶葉，就會帶有腋芽，也就有了分生組織，所以不通過愈傷組織（或脫分化）階段就可直接形成叢狀苗。過程③應在發芽或生芽培養基中進行，再分化需要光照，故全過程每天需要一定時長的光照，故選B。

（二）（1）根據以上分析可知，圖中X表示重組DNA分子，將其導入動物細胞常用顯微注射法。
（2）根據題意分析，該實驗的目的是從羊奶中提取獨特的蛛絲蛋白，因此圖中的受體細胞應該選擇雌羊的體細胞；由于體細胞核的全能性受到了限制，因此應該將體細胞核通過核移植技術移植到去核的卵母細胞中去，獲得的重組細胞才能具有表達細胞核的全能性的能力。
（3）A、根據以上分析可知，乙、丙分別表示核移植技術和早期胚胎培養技術，兩者需要的培養液的成分不完全相同，A錯誤；

B、該過程需要培養成早期胚胎，不能用胰蛋白酶分散成單個細胞，B錯誤；

C、該過程為動物細胞培養，目的是獲得早期胚胎，C錯誤；

D、該過程中供體核DNA上原有的調節蛋白會被卵細胞質中的蛋白因子替換，D正確。

故選D。
（4）為了快速繁殖轉基因山羊，可在丁過程前對早期胚胎進行胚胎分割，經培養后再分別移植到同期發情處理的未經配種的代孕母羊的相應部位。