2009屆新課標生物考點預測
――微生物的利用
一、 考點介紹
本專題是新人教課標版教材選修一模塊中的專題2《 微生物的培養與應用》部分內容，主要考點有微生物的分離和培養、某種微生物數量的測定、培養基對微生物的選擇利用、利用微生物發酵來生產特定的產物以及微生物在其他方面的應用。
試題分布
試題情景
主要考點
07四川 ?5
坐標圖的解讀
微生物的培養
07江蘇?22
微生物的營養要求
微生物的培養
07廣東?40
甘蔗的繁殖和加工
微生物的培養、培養基對微生物的選擇利用、利用微生物發酵來生產特定的產物
07寧夏?32
大腸桿菌的數量測定
微生物的分離和培養、某種微生物數量的測定
07江蘇?42
賴氨酸或谷氨
酸的生產實際
微生物的培養、利用微生物發酵來生產特定的產物
08理綜Ⅰ?3
細菌的培養
微生物的培養、培養基對微生物的選擇利用
08北京?31
藍藻爆發
微生物的分離和培養
08天津31
除草劑――莠去津
培養基對微生物的選擇利用
08廣東38
土壤中篩選能降解利用苯酚的細菌菌株的實驗過程
微生物的分離和培養、培養基對微生物的選擇利用
08廣東理基39
酵母菌液放入血球計數板直接記數
某種微生物數量的測定
本專題是選修部分的重點，也是高考的熱點。從命題角度看，主要是以微生物的應用為背景材料進行實驗設計或結合其他專題知識進行考查，考查的形式有選擇、簡答、實驗設計等。
2007年、2008年新課標高考涉及本專題的主要考點情況列表如下：
二、高考真題
1.〖解析〗在b表示的時期，細菌繁殖速度快，代謝旺盛，菌體形態和生理穩定，常用作生產用菌種和科研材料。
〖答案〗B
2．（2003?江蘇?32）發酵工程的第一個重要工作是選擇優良的單一純種。消滅雜菌，獲得純種的方法包括（ ）
A．根據微生物對碳源需要的差別，使用含不同碳源的培養基
B．根據微生物缺乏生長因子的種類，在培養基中增減不同的生長因子
C．根據微生物遺傳組成的差異，在培養基中加入不同比例的核酸
D．根據微生物對抗菌素敏感性的差異，在培養基中加入不同的抗菌素
2. 〖解析〗選擇培養基是發酵工程中獲得純種的方法之一。
〖答案〗ABD
3.（2004?天津?31）人們不會在熱泉中發現活著的嗜冷海藻，而經常可以在冷水環境中分離出嗜熱微生物。請根據酶的特性分析產生這種現象的原因
（2）淀粉酶可以通過微生物發酵生產。為了提高酶的產量，請你設計一個實驗，利用誘變育種方法，獲得產生淀粉酶較多的菌株。① 寫出主要實驗步驟。② 根據誘發突變率低和誘發突變不定向性的特點預期實驗結果。
3. 〖解析〗酶的活性受溫度影響，高溫下酶失去活性，低溫酶的活性降低，但酶分子結構沒有被破壞。設計實驗要遵循對照原則和單一變量原則，要利用誘變育種方法，一組需用一定劑量的誘變劑處理，培養時要將菌種接種于含淀粉的固體培養基上。
〖答案〗（1）嗜冷海藻體內的酶遇到高溫后，酶的分子結構被破壞而失去活性，海藻很快會死亡；而嗜熱微生物體內的酶遇到低溫環境，酶的活性降低，但酶分子結構沒有被破壞，遇到合適的溫度又可以恢復活性。（2）① 主要實驗步驟：第一步：將培養好的生產菌株分為兩組，一組用一定劑量的誘變劑處理，另一組不處理做對照。第二步：制備含淀粉的固體培養基。第三步：把誘變組的大量菌株接種于多個含淀粉的固體培養基上，同時接種對照組，相同條件下培養。第四步：比較兩組菌株菌落周圍透明圈的大小，選出透明圈變大的菌株。② 預期實驗結果：a. 由于誘發突變率低，誘變組中絕大多數菌落周圍的透明圈大小與對照組相同。b. 由于誘發突變不定向性，誘變組中極少數菌落周圍的透明圈與對照組相比變大或變小。
4．（2004?江蘇?23）掌握微生物群體的生長規律，目的是更好地研究和利用它們。下列有關描述中錯誤的是（ ）
A．生產上常常用對數期的細菌作為菌種
B．在穩定期中適當補充營養物質有利于提高產量
C．連續培養延長了培養周期，從而提高產量
D．調整期細菌的代謝活躍，體積增長快
4. 〖解析〗連續培養延長了穩定期。
〖答案〗C
5．（2004?江蘇?31）通過選擇培養基可以從混雜的微生物群體中分離出所需的微牛物。在缺乏氮源的培養基上大部分微生物無法生長；在培養基中加入青霉素可以抑制細菌和放線菌；在培養基中加入10％酚可以抑制細菌和霉菌。利用上述方法能從混雜的微生物群體中分別分離出（ ）
A．大腸桿菌 B．霉菌 C．放線菌 D．固氮細菌
5. 〖解析〗固氮細菌不需要專門添加氮源；抗生素可抑制原核微生物；10％酚可以抑制細菌和霉菌，但放線菌可生存。
6．（2005?江蘇生物?23）下列有關谷氨酸棒狀桿菌的生長和谷氨酸發酵的敘述．錯誤的是（ ）
A．組成酶是維持菌體基本生活的必要條件
B．菌體能合成各種生長因子，不需要從外界補充
C．發酵液pH呈酸性時，就會生成乙酰谷氨酰胺
D．細胞膜透性的改變，可解除代謝產物對有關酶活性的抑制
6. 〖解析〗谷氨酸發酵時，需不斷補充生長因子。
〖答案〗 B
7．（2005?廣東生物?24）在利用谷氨酸捧狀桿菌生產谷氨酸的過程中，下列敘述正確的是（ ）
①各個生長時期的長短是固定的，無法人為縮短生長周期
②對數期是采樣留種的最佳時期
③在穩定期補充營養物質可以提高產量
④調整期是收獲代謝產物的最佳時期
A、①② B、②③ C、③④ D、①④
7. 〖解析〗對數期菌體繁殖速度快，代謝旺盛，菌體形態和生理穩定，常用作生產用菌種。穩定期補充營養物質是進行連續培養，提高了產量。
〖答案〗 B
8．（2005?江蘇生物?22）下列關于平菇培養的操作程序，正確的是（ ）
A、配制牛肉膏蛋白胨培養基，接種，高壓蒸氣滅菌，培養
B、配制牛肉膏蛋白胨培養基，高壓蒸氣滅苗，接種，培養
C、配制棉予殼培養基，按種，高壓蒸氣滅菌，培養
D、配制棉子殼培養基，高壓蒸氣滅菌，接種，培養
8. 〖解析〗平菇培養是利用棉子殼培養基，接種前要進行滅菌。
〖答案〗D
9．（2005?北京春季理綜?30）將酵母分為a、b、c、d四組，用不同的方式培養，其種群增長曲線如上圖所示。請據圖回答下列問題。
（1）a呈現 型增長，該種群的生長在20h之前處于 期，20h－40h處于 期。
（2）d呈現 型增長，在100h－200h，d的增長率趨于 。若在現有條件下繼續培養，其種群數量趨于 。（A增多 B減少）
（3）隨著更換培養液的時間間隔的延長，酵母種群的增長率趨于 ，其可能的限制因素是 不足和 的積累。
9. 〖解析〗食物和空間資源充足的條件下，種群呈“J”型曲線增長，開始有個調整期，之后按指數式增長。在有限的環境條件下，種群呈“S”型曲線增長，達到最大值時，增長率為零，再繼續培養，隨著環境條件的限制，種群數量減少。
〖答案〗⑴J 調整 對數
⑵S 0（或零） B（或減小）
⑶降低（或減小） 營養 有害代謝產物（或有害產物）
10．（2005?江蘇生物?33）抗生素作為治療細菌感染的藥物，其高效性和巨大的經濟價值使抗生素工業經久不衰。其中青霉素的發現和應用具有劃時代的意義。?
(1)青霉菌發酵產生青霉素。青霉菌的新陳代謝類型是 ，青霉素是青霉菌的
代謝產物。
(2)在生產和科研中，常選用處于 期的青霉菌作為菌種或研究材料．因為此時的青霉菌代謝旺盛， 和 比較穩定
(3)對青霉菌菌體生長情況的測定，取一定體積的發酵液，經離心分離、反復洗滌后， ，再計算發酵罐中菌體的總重量。
10. 〖解析〗霉菌的代謝類型為異養需氧型，青霉素為次級代謝產物，對數期菌體形態和生理穩定，常用作生產用菌種。
〖答案〗(1)異養需氧型 次級
(2)對數 個體的形態生理特性
(3)稱菌體的濕重(稱烘干后的重量)。
11．（2005?北京?31）某化工廠的污水池中，含有一種有害的、難于降解的有機化合物A。研究人員用化合物A、磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素配制的培養基，成功地篩選到能高效降解化合物A的細菌（目的菌）。實驗的主要步驟如圖所示。請分析回答問題：
（1）培養基中加入化合物A的目的是篩選 ，這種培養基屬于 培養基。
（2）“目的菌”生長所需的氮源和碳源是來自培養基中的 ，實驗需要振蕩培養，由此推測“目的菌”的代謝類型是 。
（3）培養若干天后，應選擇培養瓶中化合物A含量 的培養液，接入新的培養液中連續培養，使“目的菌”的數量 。
（4）轉為固體培養時，常采用 的方法接種，獲得單菌落后繼續篩選。
（5）若研究“目的菌”的生長規律，將單個菌落進行液體培養，可采用 的方法進行計數，以時間為橫坐標，以 為縱坐標，繪制生長曲線。
（6）實驗結束后，使用過的培養基應該進行 處理后，才能倒掉。
11. 〖解析〗這種培養基屬于選擇培養基，選擇培養目的菌。由于化合物A為有機物，且要振蕩，說明目的菌為異養需氧型。“目的菌”生長繁殖過程中要不斷消耗營養物質，培養若干天后，應選擇培養瓶中化合物A含量減少的培養液，接入新的培養液中連續培養，使“目的菌”的數量增加。轉為固體培養時，常采用劃線的方法接種，獲得單菌落后繼續篩選。若研究“目的菌”的生長規律，將單個菌落進行液體培養，可采用定期取樣的方法進行計數，繪制生長曲線應以時間為橫坐標．以細菌數目的對數為縱坐標。實驗結束后要對培養基進行滅菌，以免污染環境。
〖答案〗（1）目的菌 選擇
（2）化合物A 異養需氧型
（3）減少 增加
（4）劃線
（5）定期取樣 細菌數目的對數
（6）滅菌
12．（2006?重慶卷?3）下列所述環境條件下的微生物，能正常生長繁殖的是（ ）
A．在缺乏生長素的無氮培養基中的圓褐固氮菌
B．在人體表皮擦傷部位的破傷風桿菌
C．在新配制的植物礦質營養液中的酵母菌
D．在滅菌后的動物細胞培養液中的禽流感病毒
12. 〖解析〗圓褐固氮菌可以利用空氣中的氮氣，不需專門添加氮源。生長素是植物激素，細菌生長不需要。
〖答案〗A
13．（2006?北京卷?3）用蔗糖、奶粉和經蛋自酶水解后的玉米胚芽液.通過乳酸菌發醉可生產新型酸奶，下列相關敘述錯誤的是（ ）
A.蔗糖消耗量與乳酸生成量呈正相關 B.酸奶出現明顯氣泡說明有雜菌污染
C.應選擇處于對數期的乳酸菌接種 D.只有奶粉為乳酸菌發解提供氮源
13. 〖解析〗乳酸菌發酵利用的氮源是奶粉和經蛋白酶水解后的玉米胚芽液。
〖答案〗D
14．（2006?廣東卷?21)下列不需要利用發酵工程的是（ ）
A.生產單細胞蛋白飼料 B．通過生物技術培育可移植的皮膚
C．利用工程菌生產胰島素 D．工廠化生產青霉素
14．〖解析〗培育可移植的皮膚是利用細胞培養而獲得。
〖答案〗B
15．（2006?廣東卷?30)某同學在進行探究大腸桿菌群體生長規律實驗時，錯誤操作是（ ）
A．在調整期擴大接種 B．隨時調整pH
C．在穩定期連續培養 D．定期檢測菌體數目
15．〖解析〗在對數期擴大接種；配制培養基時調節好pH后一般不需要在調整；穩定期，增長率為零，連續培養沒有意義。
〖答案〗ABC
16．（2006?江蘇卷?12）關于青霉素生產的敘述，正確的是（ ）
A．青霉素是青霉菌生長代謝中重要的初級代謝產物
B．用紫外線、激光、化學誘變劑處理青霉菌再經篩選的方法可以選育高產菌種
C．發酵罐接種后必須進行滅菌處理
D．在青霉菌生長的穩定期，活菌數不再增加，青霉菌產量也不再增加
16．〖解析〗用紫外線、激光、化學誘變劑處理青霉菌，都可使其發生基因突變，通過篩選，從而獲得高產菌株。
〖答案〗B
17．（2006?江蘇卷?20）關于炭疽桿菌的敘述，錯誤的是
A．具有細胞壁、細胞膜、細胞質和擬核等結構
B．通過二分裂方式進行繁殖
C．核衣殼外還有多糖、蛋白質和脂質構成的囊膜
D．同化類型是化能異養型
17．〖解析〗核衣殼是病毒的結構。
〖答案〗C
18．（2006?天津卷?31）(1)下圖為某細菌的生長曲線及A、B兩種代謝產物積累曲線。
請據圖回答問題：
①A產物合成始于細菌生長曲線的 期，屬于 代謝產物。
②B產物的積累量在細菌生長曲線的 期最大。
(2)絕大多數微生物最適生長溫度為25～37℃。為了探究培養溫度對谷氨酸棒狀桿菌代謝產物(谷氨酸)合成量的影響，設計如下實驗。在實驗中有4處錯誤，分別標以①、②、③、④，請依次分析錯誤原因。
第一步：設定培養溫度為
第二步：將菌種接種到滅菌后的液體培養基中，分別在設業的溫度條件下
第三步：在定時取樣，分別測定谷氨酸合成量，記錄結果并繪制曲線。
實驗結果預測及結論：若在30℃培養條件下，谷氨酸合成量最大，則認為，。
① 。
② 。
③ 。
④ 。
18．〖解析〗觀察圖可知，A產物是細菌生長到一定階段在對數期產生的，是次級代謝產物，B的積累量在穩定期達到最大。微生物最適生長溫度為25～37℃，只設置三個溫度，范圍過窄，谷氨酸棒狀桿菌為好氧菌，密閉培養是不可以的。谷氨酸合成在各個時期均有合成，由于實驗操作過程有誤，結果預測不準確。
〖答案〗(1)①對數；次級 ②穩定
(2)①溫度設定范圍過窄
②谷氨酸棒狀桿菌是好氧細菌，不應密閉培養
③從調整期至衰亡期均有谷氨酸的合成，故取樣時期有遺漏
④實驗結果有局限性，合成谷氨酸的最適培養溫度有可能高于30℃
19．(2007?全國理綜Ⅰ?4)通過發酵到大規模生產谷氨酸，生產中常用的菌種是溶氧的氨酸棒狀桿菌。下面在有關谷氨酸發酵過程的敘述，正確的是（ ）
A.溶氧充足時，發酵液中有乳酸的累積
B.發酵液中碳源和氮源比例的變化不影響谷氨酸的產量
C.菌體中谷氨酸的排出，有利于谷氨酸的合成和產量的提高
D.發酵液pH呈堿性時，有利于谷氨酸棒狀桿菌生成乙酰谷氨酰胺
19. 〖解析〗谷氨酸棒狀桿菌是好氧型細菌，在氧氣充足時，不會有乳酸的積累；碳源與氮源之比影響谷氨酸的產量，當培養基中碳源與氮源之比為4：1時，菌體大量繁殖而產生的谷氨酸少，而當培養基中碳源與氮源之比為3：1時，菌體繁殖受到抑制，谷氨酸的合成量增加；谷氨酸合成過多時，會抑制谷氨酸脫氫酶的活性，從而使谷氨酸的合成過程中斷，因此需要及時排出谷氨酸，才可以解除抑制作用；當發酵液的pH為酸性時，谷氨酸棒狀桿菌會產生乙酰谷氨酰胺。
〖答案〗C
20．(2007?四川理綜? 5)在細菌的連續培養過程中，要以一定速度不斷添加新的培養基，同時以同樣速度放出老的培養基。右下圖表示培養基的稀釋率（培養基的更新速率）與培養容器中營養物質濃度、細菌代時（細菌數目增加一倍所需的時間）、細菌密謀的關系。下列相關敘述不正確的是（ ）
A．在稀釋率很低的情況下，稀釋率的增加會導致細菌密度增加
B．稀釋率從a到b的變化過程中，細菌生長速度不斷提高
C．稀釋率超過b點后，營養物質濃度過高導致細菌死亡率增大，細菌密度降低
D．為持續高效地獲得發酵產品，應將稀釋率控制在b點附近
20. 〖解析〗微生物的生長有一定的規律，可以劃分四個時期，調整期、對數期、穩定期和衰亡期。連續培養就是根據各個時期的特點，使微生物保持較長時間的高速生長。微生物的生長受多種因素的限制，其中營養物質的濃度就是一個因素，營養物質對生長的影響，表現為只有在低濃度時才影響生長速率，濃度高時并不影響生長的速率，因此 A和B答案是正確的。而在b是一個臨界點，b點后，細菌的密度減小，代謝產物也會減少，要持續高效獲得發酵產品，應控制在b點附近。
說明：此題經我本人查大學微生物 教材，屬于恒化連續培養，其培養基成分中，必須將某種必需的營養物質控制在較低的濃度，以作為限制因子，而其他營養物質均過量，隨著細菌的生長，限制因子的濃度就會降低，致使細菌的生長速率受到限制。但通過自動控制系統來保持限制因子的恒定流速，不斷補充，就能使細菌保持恒定的生長速率。恒化連續培養方法是研究自然條件下微生物體系比較理想的實驗模型，因為，生長在自然界中的微生物一般處于低營養濃度條件下生長也較慢。
〖答案〗C
21．(2007?江蘇?22)不同的微生物對營養物質的需要各不相同。下列有關一種以CO2為惟一碳源的自養微生物營養的描述中，不正確的是（ ）
A． 氮源物質為該微生物提供必要的氮素
B．碳源物質也是該微生物的能源物質
B． 無機鹽是該微生物不可缺少的營養物質
D．水是該微生物的營養要素之
21. 〖解析〗CO2不能提供能量。
〖答案〗B
22（2007?江蘇生物?42)發酵工程在工業生產上得到廣泛應用，其生產流程如下圖所示。結合賴氨酸或谷氨酸的生產實際，回答相關問題。
(1)人工控制微生物代謝的措施包括 ▲ 和 ▲ 。目前采用①▲ 已經選育出不能合成高絲氨酸脫氫酶的 ▲ 新菌種。
(2)在發酵過程中，產物源源不斷地產生。這說明賴氨酸或谷氨酸的生產采用了 ▲ 的發酵方式。在生產過程中，由于賴氨酸或谷氨酸的發酵菌種為 ▲ ，常需增加通氧量。當發酵生產的產品是代謝產物時，還要采用② ▲ 等分離提純的方法進行提取。
22. 〖解析〗通常采用誘變育種的方法培育微生物新品種，培育出的不能合成高絲氨酸脫氫酶的是黃色短桿菌。谷氨酸棒狀桿菌為好氧菌，產物可用蒸餾等方法提取。
〖答案〗(1)改變微生物遺傳特性 控制生產過程中的各種條件 誘變育種 黃色短桿菌
(2)連續培養 好氧菌 萃取(或蒸餾或離子交換等)
23．(2007?山東理綜?34）乙醇等"綠色能源"的開發備受世界關注。利用玉米秸稈生產燃料酒精的大致流程為：
（1）玉米秸稈預處理后，因該選用____酶進行水解，使之轉化為發酵所需的葡萄糖。
（2）從以下哪些微生物中可以提取上述酶？________（多選）
A.釀制果醋的醋酸菌 B.生長在腐木上的霉菌
C.制作酸奶的乳酸菌 D.生產味精的谷氨酸棒狀桿菌
E.反芻動物瘤胃中生存的某些微生物
（3）若從土壤中分離生產這種酶的微生物，所需要的培養基為______（按功能分），培養基中的碳源為___________ 。
（4）從生物體提取出的酶首先要檢測 _______ ，以便更好地將酶用于生產實踐。在生產糖液的過程中，為了使酶能夠反復利用，可采用___________技術。
（5）發酵階段需要的菌種是_________，生產酒精是要控制的必要條件是________ 。
23. 〖解析〗用植物秸稈生產酒精是利用微生物進行發酵的過程。植物秸稈中的有機物主要是纖維素，需要纖維素酶才能將其水解成葡萄糖，生長在腐木上的霉菌及反芻動物瘤胃中生存的某些微生物中含有纖維素酶，若從土壤中分離產生這種酶的微生物，所用的培養基為選擇培養基，利用的碳源為纖維素。微生物發酵過程中，影響其發酵的因素主要有溶氧、溫度和pH等。
〖答案〗（1）纖維素（酶）（2）B、E (3)選擇培養基；纖維素
（4）酶的活性 固定化酶（或固定化細胞） （5）酵母菌；無氧（密封、密閉）
24．(2007?廣東?40）為了實現燃料供應來源多樣化，發展長期替代化石燃料的產品如燃料酒精、生物柴油、沼氣等已經列入我國未來10年的發展計劃。
廣東省是我國甘蔗主產區之一。甘蔗是一種高光效的C；植物，單位面積產量很高，
種植面積日益擴大，目前已成為南方地區燃料酒精生產的重要原料。利用甘蔗生產燃料
酒精的一般工藝流程為：甘蔗。榨汁（蔗糖）、酵母發酵一蒸餾。成品（燃料酒精）。
請根據上述材料，回答下列問題：
（1)簡述甘蔗大規模快速繁殖技術的過程。
（2）具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌是理想的酒精發酵菌種，對野生酵母菌進行誘變后通過篩選可以得到具有這些特性的突變菌，誘變及篩選過程如下：
步驟1：野生菌液體培養一段時間后接受紫外線照射誘變處理。
步驟2;制備選擇培養基。在基本培養基的基礎上，注意＿＿，加瓊脂后滅菌，制成固體平板。
步驟3：將紫外照射后的菌液稀釋涂布平板。
步驟4：根據-一一篩選出突變菌。
（3)上述步驟2、3和4的依據分別是＿。
(4）利用獲得的突變菌和蔗汁進行酒精發酵實驗，除了將培養基滅菌、保持空間潔凈外，發酵過程中防止外來雜菌人侵還有哪些可行方法？（列舉兩種）
（S)甘蔗榨汁以后還有大量的蔗渣廢棄物，主要成分為木質素、纖維素和半纖維素，
但是酵母菌無法直接利用，原因是其＿。請提出解決該問題的方法。（列舉兩種方法）
(6）突變菌往往帶有一些特殊的基因。在獲得這些基因的過程中，PCR技術相當重要。PCR擴增反應中加人引物和DNA聚合酶的作用分別是什么？
24. 〖解析〗綜合考查考生對生物技術實踐模塊中的植物組織培養、特殊微生物的篩選及應
用、酶的應用以及PCR技術的基本操作和應用等內容的掌握；理論聯系實際，
針對生物學問題進行初步研究，設計實驗路線，對實驗結果和現象進行正確的分
析與判斷，綜合運用所學知識解決實際問題的能力。
〖答案〗（1)選取甘蔗外植體，通過誘導脫分化產生愈傷組織，然后通過調整植物激素比
例，再分化形成芽和根，獲得大量試管苗（或通過誘導大量形成胚狀體，制成
人工種子，適宜條件下萌發長成幼苗）。
（2)添加高濃度蔗糖（葡萄糖）；調低pH值；是否能在選擇培養基上生長。
（3）提供高糖和酸性的篩選環境；獲得單菌落；能生長代表該菌落具有耐高糖和耐
酸的特性。
(4)①利用突變菌的耐酸特性，降低培養基的pH值，達到抑菌的目的；②利用突
變菌的耐高糖特性，通過高滲環境達到抑菌目的；③保持厭氧環境，達到抑菌
目的；④在培養基中添加一些抑制物如特殊的抗生素，達到抑菌目的。
(5）缺乏相應分解酶系（或缺乏纖維素酶和半纖維素酶）。在酵母菌中轉人分解酶
系相關基因；利用酶或微生物分解蔗渣；利用物理和化學方法分解蔗渣；將酵
母菌與其他能分解蔗渣的微生物混合發酵。
（6）引物的作用是結合在模板DNA上，提供DNA延伸起始位點；DNA聚合酶的作
用是從引物的3'端開始催化DNA鏈的延伸。
25．(2007?寧夏理綜?32)某小組同學為了調查湖水中細菌的污染情況而進行了實驗。實驗包括制備培養基、滅菌、接種及培養、菌落觀察計數。請回答與此實驗相關的問題。
（1）培養基中含有蛋白胨、淀粉分別為細菌培養提供了____和______。除此之外，培養基還必須含有的基本成分是_____和______。
（2）對培養基進行滅菌，應該采用的方法是_______。
（3）為了盡快觀察到細菌培養的實驗結果，應將接種了湖水樣品的平板置于______中培養，培養的溫度設定在37℃。要使該實驗所得結果可靠，還應該同時在另一平板上接種______作為對照進行實驗。
（4）培養20小時后，觀察到平板上有形態和顏色不同的菌落，這說明湖水樣品中有_____種細菌。一般說來，菌落總數越多，湖水遭受細菌污染的程度越_______。
（5）如果提高培養基中NaCl的濃度，可以用于篩選耐_______細菌，這種培養基被稱為____。
25. 〖解析〗蛋白胨主要提供氮源，淀粉提供碳源，微生物所需要的基本營養還有水和無機鹽。培養基用高壓蒸汽滅菌，接種后放入恒溫培養箱，用無菌水做對照。不同微生物形成的菌落不同，有多種菌落即有多種細菌；污染程度越重，菌落總數越多。培養基中加高濃度的NaCl為選擇培養基。
〖答案〗（1）氮源（碳源不作要求） 碳源、無機鹽、水
（2）高壓蒸汽滅菌
（3）恒溫培養箱 無菌水
（4）多；高
（5）鹽（或NaCl），選擇性培養基
26．(08?理綜Ⅰ?3)下列關于細菌的敘述，錯誤的是（ ）
A．硝化細菌能以NH3作為氮源和能源物質
B．某些細菌可以利用光能因定CO2合成有機物
C．生長因子是某些細菌生長過程中需要額外補充的營養物質
D．含伊紅和美藍試劑的培養基不能用來簽別牛奶中的大腸桿菌
26. 〖解析〗某些細菌如藍細菌（藍藻）、光合細菌以及紅螺菌都能進行光合作用。生長因子是指微生物生長不可缺少的微量有機物，主要包括維生素、氨基酸和堿基等。而微生物的營養物質包括水、無機鹽、碳源、氮源和生長因子，它們都是要從外界獲得補充的。常用的伊紅美藍乳糖培養基，可用來鑒別飲用水和乳制品中是否存在大腸桿菌等細菌，如果有大腸桿菌，則菌落呈黑色。
〖答案〗D
27．(08?北京?31)水華可因藍藻爆發所致。科研人員嘗試利用某種細菌限制藍藻數量，相關實驗的示意圖如下。圖中①～⑥表示實驗步驟。
請回答問題
（1）從細胞結構的特點與復雜程度上看，藍藻屬于 細胞；從生態系統的營養結構上看，藍藻屬于 細胞。藍藻的停放類型通常是 。
（2）引發水華的藍藻可產生藍藻毒素。藍藻毒素 （是、不是）藍藻生長、繁殖所必需的物質。藍藻毒素對人是一種致癌因子，可使原癌基因 ，導致正常細胞發生癌變。
（3）圖中②、⑤通常使用的是①、④中已培養至 期的藍藻和溶藻細菌。
（4）圖中⑤實驗組在每個培養皿中，如果做三個重復實驗，可采取的做法是：
。
（5）藍藻通常呈藍綠色，觀察實驗結果，發現培養皿中出現褪色空斑，說明藍藻
。
27. 〖解析〗藍藻（藍細菌）是原核生物，進行光合作用，是自養需氧生物，在生態系統的成分中屬生產者，在營養結構中是處于第一營養級。藍藻毒素是藍藻的次級代謝產物，可使藍藻在生存斗爭中處于較有利的地位。原癌基因在正常情況下是處于被抑制狀態，當在致癌因子作用下原癌基因被激活，正常細胞分化成為癌細胞。對數期的菌體形態和生理特征穩定，所以微生物培養中，通常選用對數期菌體作為菌種進行培養。題干中已經提示，“在每個培養皿中”“做三個重復實驗”，所以只能在一個培養皿中選擇三個不同位置，且是重復實驗，處理條件是完全相同的。實驗組是滴加含溶藻細菌的培養液，那么對照組就滴加不含溶藻細
菌的培養液，其他條件均相同（如加的培養液的量、光照、培養的溫度等）。由于藍藻先培養，先形成菌落（綠斑），后加入溶藻細菌的培養液，溶藻細菌分解綠斑里的藍藻，最終會使藍藻的菌落（綠斑）褪色成為空斑（藍澡徹底被裂解死亡）。
〖答案〗⑴原核 第一營養級 自養需氧型
⑵不是 從抑制狀態變成激活狀態
⑶對數
⑷在每個培養皿中，選擇三個不同位置，各滴加等量菌液 在每個培養皿中，選擇三個不同位置，各滴加等量的、不含溶藻細菌的溶藻細菌培養液
⑸被溶藻細菌裂解（死亡）
28．(08?天津?31)莠去津是一種含氮的有機化合物，它是廣泛使用的除草劑之一。
（1）莠去津的作用機理之一是阻斷光反應中的電子傳遞過程，影響NADP＋形成 ，進而影響在 中進行光合作用的暗反應過程，最終抑制雜草生長。
（2）從使用莠去津農田中，選到了能遺傳的耐莠去津雜草，將它與敏感莠去津植株雜交，結堅果見下表：
雜交親本
后代中耐藥型植株比例（%）
后代中敏感型植株比例（%）
耐藥型♀×敏感型♂
100
0
敏感型♀×耐藥型♂
0
100
由表推斷，控制該耐藥性狀的基因位于 。
（3）莠去津在土壤中不易降解，為修復被其污染的土壤，按下面程序選育能降解莠去津的細菌（目的菌）。已知莠去津在水中溶解度低，含過量莠去津的固體培養基不透明。
據圖回答：
①由于莠去津的 作用，在長期使用莠去津的土壤中可能含有目的菌。
③在固體培養基中，無透明菌落利用的氮源主要是 ；有透明帶菌落利用的氮源主要是 ，據此可篩選出目的菌。
28. 〖解析〗雜交實驗中，不管是正交還是反交，后代性狀總是與母本性狀保持一致，可確定是細胞質遺傳（該藥物是影響光合作用過程，故抗藥基因極可能是位于葉綠體）。
A和C既是一個選擇培養的過程，也是一個擴大培養的過程。選擇的條件是氮源（莠去津或氮氣）和（或）氧氣；通過擴大培養可提高選擇出來的所需細菌的密度。
固體培養基中的氮源只有莠去津及空氣中的氮氣。有透明帶菌落說明該菌落的細菌分解了使培養基不透明的莠去津；無透明帶菌落的細菌并沒有分解莠去津，那么它們利用的氮源應是氮氣，是自生固氮菌。
〖答案〗（1）NADPH 葉綠體基質 （2）細胞質中
（3）①自然選擇
②初步選擇能降解莠去津的細菌（目的菌）并提高其密度 培養液中缺少甲類細菌可利用的氮源或（和）有氧條件抑制了甲類細菌的生長 對數
③氮氣 莠去津
29．(08?廣東?38)苯酚是工業生產排放的有毒污染物質，自然界中存在著降解苯酚的微生物。某工廠產生的廢水中含有苯酚，為了降解廢水中的苯酚，研究人員從土壤中篩選獲得了只能降解利用苯酚的細菌菌株，篩選的主要步驟如圖所示，①為土壤樣品，請回答下列問題：
（1）②中培養口的菌株的選擇培養基中應加入 作為碳源，②中不同濃度碳源的培養基 （A.影響；B.不影響）細菌的數量，如果要測定②中活細菌數量，常采用 法。
（2）④為對照、微生物在④中不生長、在⑤中生長，④與⑤培養基的主要區別在于 ；使用 法可以在⑥上獲得單菌落。采用固體平板培養細菌時為什么進行倒置培養？
（3）如何比較不同菌株降解苯酚能力的大小？
（4）實驗過程中如何防止其它微生物的污染？
29. 〖解析〗（1）②中的選擇培養基中應加入苯酚作為碳源，②中不同濃度的碳源A影響細菌數量，稀釋涂布平板法來測定②中活菌數目。
（2）④與⑤培養基的主要區別在于④的培養基沒有加入苯酚作為碳源，⑤培養基的中加入苯酚作為碳源。使用釋涂布平板法或平板劃線法可以在（6）上獲得單菌落。采用固體平板培養細菌時要倒置培養，以防止冷凝后形成的水珠滴落在培養基上污染培養基。
（3）5支潔凈培養瓶→分別加入相同培養基（加等量的苯酚，用pH試紙檢測這5支瓶內培養基的pH值，用苯酚調試使之相等，苯酚是唯一的碳源）→分別接種5種等量的來自不同菌株的菌種→在相同的適宜條件下培養相同時間→再用pH試紙檢測這5支瓶內培養基的pH苯酚顯酸性，不同菌株的菌種降解苯酚的能力不同，5支瓶內培養基中的苯酚被分解的量不同，所以pH值不同。用pH試紙檢測這5支瓶內培養基的pH值，從而比較不同菌株降解苯酚能力的大小。
（4）從制備培養基到接種與培養等全部實驗過程要無菌操作。
〖答案〗（1）苯酚 稀釋涂布平板法
（2）④的培養基沒有加入苯酚作為碳源 釋涂布平板法或平板劃線法 以防止冷凝后形成的水珠滴落在培養基上污染培養基。
（3）用同樣苯酚濃度的培養液培養不同菌株，一定時間后，測定培養液中苯酚含量
（4）培養基滅菌、接種環滅菌、接種過程無菌操作。
30．(08?廣東理基?39)取少量酵母菌液放入血球計數板直接記數，測得的數目是（ ）
A．活細胞數 B．死細胞數 C．菌落數 D．細胞總數
30. 〖解析〗血球計數板直接記數的是細菌總數，不能排除死菌。
〖答案〗D
31．（08?上海?41）利用纖維素解決能源問題的關鍵是高性能纖維素酶的獲取。請完善實驗方案，并回答相關問題。
【實驗目的】比較三種微生物所產生的纖維素酶的活性。
【實驗原理】纖維素酶催化纖維素分解為葡萄糖，用葡萄糖的產生速率表示酶活性大小；用呈色反應表示葡萄糖的生成量。
【實驗材料】三種微生物（A～C）培養物的纖維素酶提取液，提取液中酶蛋白濃度相同。
【實驗步驟】
（1）取四支試管，分別編號。
（2）在下表各列的一個適當位置，填寫相應試劑的體積量，并按表內要求完成相關操作。
（3）將上述四支試管放入37℃的水浴，保溫1小時。
（4）在上述四支試管中分別加入 試劑，搖勻后，進行 處理。
（5）觀察比較實驗組的三支試管與對照組試管的顏色及其深淺。
【實驗結果】
微生物A提取物
微生物B提取物
微生物C提取物
顏色深淺程度
＋
＋＋＋
＋＋
【分析討論】
（1）該實驗中的對照組是 號試管。
（2）實驗組試管均呈現的顏色是 ，但深淺不同。
（3）上述結果表明：不同來源的纖維素酶，雖然酶蛋白濃度相同，但活性不同。若不考慮酶的最適pH和最適溫度的差異，其可能原因是 。
（4）你認為上述三種微生物中，最具有應用開發價值的是 。
（5）從解決能源問題的角度，開發這種纖維素酶的意義在于
。
31. 〖解析〗從表中可以看出，實驗者是用第4支試管來作為對照的，在實驗步驟中，要達到每支試管中溶液總量均為2.0ml,比較各組中的變量關系,就會發現1、2、3支試管中的區別應該是酶的種類不同，第4支試管中不加酶，而加入等量的蒸餾水，其它因素均相同。故在1號試管中應補充等量的緩沖液，2號試管中應補充等量的微生物B的提取物，3號試管中也補充與其它試管等量的纖維素縣浮液，4號試管中應補充的蒸餾水量=1.4+0.1=1.5ml。欲檢測四支試管的實驗產物的量，可用班氏試劑或斐林試劑，出現的現象是紅黃色或磚紅色，含糖量越多，顏色越深。上述結果中，若不考慮酶的最適PH和最適溫度的差異，在酶濃度也相同時，酶活性的差異就應該是酶本身的差異了，如酶的氨基酸序列不同或空間結構不同。上述三種微生物中，產物中含糖量最大的說明其酶的活性最強，即微生物B最有開發的價值。開發此酶可以解決農產品秸稈轉化問題，可以為利用農產品的廢棄物來生產飼料或酒精等開辟新機遇等。
〖答案〗【實驗步驟】（2）如下表
（4）班氏 加熱（加熱至沸騰）
【分析討論】（1）4 （2）紅黃色 （3）不同酶的氨基酸序列不同（不同酶的空間結構不同） （4）微生物B （5）葡萄糖可用作制取酒精的原料；用纖維素代替化石燃料（言之有理即給分）
三、名校試題
1．（山東莒南一中2009年2月高三階段檢測，20）關于微生物的營養，說法正確的是( )
A．同一種物質不可能既作碳源又作氮源 B．凡是碳源都能提供能量
C．除水以外的無機物僅提供無機鹽 D．無機氮源也能提供能量
1.〖解析〗對異養微生物來說，含C、H、0、N的化合物既是碳源，又是氮源。CO2是光能自養細菌的碳源，但不能提供能量。CO2和N2是無機物，也是微生物的碳源和氮源。硝化細菌所利用的氮源是無機氮源氨，同時氨也為硝化細菌提供用以化能合成作用的能源。
〖答案〗D
2．（山東臨沭一中2009年2月高三選修測試，8）能夠測定樣品活菌數的方法是( )
A．稀釋涂布平板法 B．直接計數法 C．重量法 D．比濁法
2. 〖解析〗利用稀釋涂布平板法可以使單個活菌在固體培養基上分散開來，并繁殖形成菌落，從而根據菌落數測定出測定樣品活菌數。
〖答案〗A
3. （山東莒南一中2009年2月高三階段檢測，21）培養基、培養皿、接種環、實驗操作者的雙手、空氣、牛奶所采用的滅菌、消毒方法依次是( )
①化學消毒 ②灼燒滅菌 ③干熱滅菌 ④紫外線滅菌 ⑤高壓蒸汽滅菌 ⑥巴氏消毒法
A．⑤③②①④⑥ B．①②③④⑤⑥ C．⑥②③④①⑤ D．③④②①⑥⑤
3. 〖解析〗根據滅菌、消毒方法的適用范圍解答該題。
〖答案〗A
4. （山東臨沭一中2009年2月高三選修測試，9）在做土壤中分解尿素的細菌的分離與計數實驗時，甲組實驗用氮源只含尿素的培養基，乙組實驗用氮源除尿素外還含硝酸鹽的培養基，其他成分都相同，在相同條件下操作，培養與觀察，則乙組實驗屬于（ ）
A．空白對照 B．標準對照 C．相互對照 D．條件對照
4. 〖解析〗 乙組和甲組實驗的培養條件不同，形成了條件對照。
〖答案〗D
5.（ 08山東臨沂高二期末測試，10）培養SARS病毒時，應選用（ ）
A．固體培養基 B．含有多種無機鹽的培養液 C．活的雞胚 D．牛肉湯
5. 〖解析〗病毒只有寄生在宿主的活細胞內才能進行繁殖等。
〖答案〗C
6．（ 08山東濱州高二期末測試，15）關于制備牛肉膏蛋白胨固體培養基，敘述錯誤的是（ ）
A．操作順序為計算、稱毓、溶化、倒平板、滅菌
B．將稱好的牛肉膏連同稱量紙一同放人燒杯
C．待培養基冷卻至50℃左右時進行倒平板
D．待平板冷卻凝固約5～lOmin后將平板倒過來放置
6. 〖解析〗制備牛肉膏蛋白胨固體培養基的步驟是計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板，不能顛倒。牛肉膏容易吸潮．所以當牛肉膏溶化并與稱量紙分離后，用玻棒取出稱量紙。待培養基冷
卻至50℃，用手觸摸錐形瓶剛剛不燙手，并且培養基處于溶化狀態。平板冷卻幾分鐘后還需倒置。
〖答案〗A
7. （ 08江蘇南通高三模擬，19）通過選擇培養基可以從混雜的微生物群體中分離出所需的微生物。在缺乏氮源的培養基上大部分微生物無法生長；在培養基中加入青霉素可以抑制細菌和放線菌；在培養基中加入lO％酚可以抑制細菌和霉菌。利用上述方法能從混雜的微生物群體中分別分離出 ( )
①大腸桿菌；②霉菌；③放線菌；④固氮細菌。
A．②③④ B．①②③ C．①③④ D．③④
7.〖解析〗 缺乏氮源的培養基上大部分微生物無法生長，而固氮細菌能生長；在培養基中加入青霉素可以抑制細菌和放線菌，霉菌能生長；在培養基中加入lO％酚可以抑制細菌和霉菌，放線菌能生長。
〖答案〗A
8. （ 08江蘇徐州高三模擬，19）在農田土壤的表層自生固氮菌較多。將用表層土制成的稀泥漿接種到特制的培養基上培養，可將自生固氮菌與其他細菌分開，對培養基的要求是( )
①加抗生素 ②不加抗生素 ③加氮素 ④不加氮素 ⑤加葡萄糖 ⑥不加葡萄糖
⑦37℃恒溫箱中培養 ⑧28～30℃溫度下培養
A．①③⑤⑦ B．②④⑥⑧ C．②④⑤⑧ D．①④⑥⑦
8. 〖解析〗自生固氮菌有固氮功能，因此培養基中不需要加氮素，細菌對抗生素敏感，因此，不能加，自生固氮菌是異養的，應加葡萄糖，生長繁殖的適宜溫度是28～30℃。
〖答案〗C
9．（ 08山東壽光高三模擬，24）微生物與人類關系密切。雖然有些微生物能使動植物患病，但多數微生物對人類是有益的，請回答下列有關問題：
(1)下表為兩種微生物的培養基配方。
KH2P04
Na2HP04
MgS04?7H20
葡萄糖
尿素
瓊脂
1.4g
2.1g
0.2g
10.0g
1.0g
15.0g
纖維素粉
NaN03
Na2HP04?7H20
KH2P04
MgS04?7H20
KCl
酵母膏
水解酪素
5g
lg
1.2g
0.9g
O.5g
0.5g
O.5g
0.5g
上述兩種培養基中的物質溶解后，均用蒸餾水定容到1000 mL。
①如果要進行土壤中分解尿素的細菌的分離，則需要選擇上述哪種培養基?___________，該培養基能分離尿素分解菌的原因是______________________________________________。
②在該培養基中可加入_________指示劑，根據指示劑的顏色可鑒定該種細菌能夠分解尿素。
③從功能上來看，上述兩種培養基均屬于_______________________________培養基。
(2)在制備牛肉膏蛋白胨固體培養基的倒平板操作時，平板冷凝后，應將平板___________放置，這樣做的目的是可防止__________________________________________造成污染。
(3)微生物接種的方法很多，在用平板劃線法操作結束時，為什么仍需要灼燒接種環?__________________________________________________________________________。
9. 〖解析〗 如要進行土壤中分解尿素的細菌的分離，培養基中尿素是唯一的氮源，這樣只有能分解尿素的微生物才能生長繁殖，這樣的培養基屬于選擇培養基。接種時及接種操作結束時，仍需要灼燒接種環以殺死接種環上殘留菌種，避免細菌污染環境和感染操作者。
〖答案〗(1)①A 培養基中尿素為唯一氮源，只有能分解尿素的微生物才能生長繁殖
②酚紅 ③選擇 (2)倒過來 皿蓋上的水珠落入培養基 (3)殺死接種環上殘留菌種，避免細菌污染環境和感染操作者
10．（2008廣東市二模生物試題，38）飲用水的質量問題是2007年最引人關注的問題之一。大腸菌群是一群以大腸埃希氏菌為主的需氧及兼性厭氧細菌。大腸菌群指數(c。U―index)指1升水中含有的大腸菌群數。大腸菌群指數常用于飲用水、食品、飲料等的衛生檢測。檢測中規定生活飲用水的水質標準為1升水中大腸菌群不得超過3個，即大腸菌群指數不得大于3。
某人在測定自來水中的大腸桿菌群時，先將5升自來水水樣濃縮至5毫升，然后各取濃縮水樣1毫升，涂布到4個培養皿中培養，4次培養后計數的菌落數分別是32、38、35、8。請回答下列問題：
(1)根據上述結果計算，被檢水樣大腸菌群指數為 ，水樣 (是、否)達標。
(2)下表是某公司研發的一種測定大腸菌群的配方(g／L)。
從成分看，該培養基的類型是 培養基，可以推測培養基配方中的營養物質應包括碳源、氮源和 。
(3)培養大腸桿菌時，常用的接種方法是平板劃線法和稀釋平板涂布法，但無論哪種接種方法，其主要目的都是防止雜菌污染，請指出滅菌和消毒這兩種方法的差異。
。
10. 〖解析〗統計菌落數應注意選擇菌落數在30～300的平板進行計數，濃縮為1毫升后涂布的4個平板中，有一個的菌落數為8，不能計數，所以被檢水樣大腸菌群指數為（32+35+38）/3=35（個）。大腸桿菌數超標，為不達標水。培養基中有凝固劑瓊脂，可知為固體培養基。培養基的基本營養成分有碳源、氮源、無機鹽、水等成分。
〖答案〗(1)35 否
(2)固體(鑒定) 無機鹽
(3)消毒是指使用較為溫和的物理或化學方法反殺死物體表面或內部一部分對人體有害的微生物(不包括芽孢和孢子)。滅菌則是指使用強烈的理化因素殺死物體內外所有的微生物，包括芽孢和孢子。
四、考點預測
從07、08年的高考題可以看出，注重與現實生活的聯系，是生物新課標的重要理念，而這一理念在這一專題可以得到明顯的體現。07年寧夏的題目以調查湖水中細菌的污染情況為切入點，綜合考查培養基的有關知識，08年廣東的題目以篩降解苯酚的細菌菌株為切入點，綜合了實驗設計和識別等方面的知識，都是有關環境污染治理的問題。由此預計，未來的高考題仍會在這方面加以考查。
2．考點預測題
1．配制的培養基成分是：纖維素粉、NaN03、Na2HP04、KH2P04、MgS04、KCl、酵母膏、水解酪素，該培養基能使下面哪種微生物大量繁殖 ( )
A．酵母菌 B．自生固氮菌 C．各種細菌 D．纖維素分解菌
1. 〖解析〗該培養基中加入了纖維素粉，而只有纖維素分解菌能利用纖維素。
〖答案〗D
2．下列說法不正確的是( )
A．科學家從70～80℃熱泉中分離得到耐高溫的TaqDNA聚合酶
B．統計某一稀釋度的5個平板的菌落數依次為M1、M2、M3、M4、M5，以M3作為該樣品菌落數的估計值
C．設置對照實驗的主要目的是排除實驗組中非測試因素對實驗結果的影響，提高實驗結果的可信度
D．同其他生物環境相比，土壤中的微生物數量最大，種類最多
2. 〖解析〗 統計菌落數應注意選擇菌落數在30～300的平板進行計數，且至少涂布3個平板作為重復組，重復組的結果應一致，然后取平均值進行計算。
〖答案〗B
3．關于制備牛肉膏蛋白胨固體培養基，敘述錯誤的是
A．操作順序為計算、稱毓、溶化、倒平板、滅菌
B．將稱好的牛肉膏連同稱量紙一同放人燒杯
C．待培養基冷卻至50℃左右時進行倒平板
D．待平板冷卻凝固約5～lOmin后將平板倒過來放置
3．〖解析〗制備牛肉膏蛋白胨固體培養基的步驟是計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板，不能顛倒。牛肉膏容易吸潮．所以當牛肉膏溶化并與稱量紙分離后，用玻棒取出稱量紙。待培養基冷
卻至50℃，用手觸摸錐形瓶剛剛不燙手，并且培養基處于溶化狀態。平板冷卻幾分鐘后還需倒置。
〖答案〗A
4．富集培養是微生物學中最強有力的技術手段之一。主要是指利用不同微生物問生命活動特點的不同，制定環境條件，使僅適應該條件的微生物旺盛生長，從而使其在群落中的數量大大增加，人們能夠更容易地從自然界中分離到所需的特定微生物。富集條件可根據所需分離的微生物的特點，從物理、化學、生物及綜合多個方面進行選擇，如溫度、pH、紫外線、高壓、光照、氧氣、營養等許多方面。如圖描述了采用富集方法從土壤中分離能降解酚類化合物對羥基苯甲酸的微生物的實驗過程。
(1)本實驗所需培養基為_____________，碳源為____________________.
(2)實驗原理是____________________________．
(3)①一③重復培養的目的是___________________________________________.
(4)⑤的菌落中大部分是降解__________________的微生物。
(5)⑥為__________組，⑦為__________組，設置⑥的目的是______________________。
(6)⑤一⑥采用______________法。接種到⑥的培養基中，在操作過程中為防止污染應注意的事項是_____________________________________________________________________.
4. 〖解析〗本實驗所用培養基是以對羥基苯甲酸為惟一碳源的選擇培養基，培養的微生物主要是能降解對羥基苯甲酸的微生物。經過①②③的重復培養，增大了分解對羥基苯甲酸的微生物的比例。最后通過設立對照及單菌落挑取法將培養基上的單菌落分別接種到含有對羥基苯甲酸及不含有該物質的培養基上，驗證是否得到了目的菌株。整個操作過程都應是無菌操作，所用儀器和培養基都需滅菌，操作要在酒精燈火焰旁進行，接種環用完之后也要在火焰上灼燒以殺滅殘留微生物。
〖答案〗 (1)選擇培養基 對羥基苯甲酸
(2)利用以對羥基苯甲酸為惟一碳源的選擇培養基，經富集培養，選擇出能降解酚類化合物對羥基苯甲酸的微生物
(3)增大分解對羥基苯甲酸微生物的比例
(4)對羥基苯甲酸
(5)對照實驗說明通過富集培養的確得到了欲分離的目標微生物
(6)單菌落挑取 接種環在火焰上灼燒滅菌，燒紅的接種環在空氣中冷卻，同時將培養皿蓋打開一條縫隙挑取菌落接種到試管中并將試管口通過火焰塞好棉塞，接種環在火焰上灼燒，殺滅殘留微生物
5．現已有近20個國家正在進行細菌堆浸冶金。全世界銅的總產量中約有15％是用細菌浸出法生產的。冶銅用的菌種主要是氧化亞鐵硫桿菌，這種菌種能氧化輝銅礦(Cu2S)等各種硫化礦獲得能量，并產生硫酸和硫酸鐵，這兩種化合物可作用于輝銅礦(Cu2S)，把礦中的銅以硫酸銅形式溶解出來，再用鐵置換出銅，生成的硫酸亞鐵又可被細菌作為營養物氧化成硫酸鐵，如此往復循環，最后從溶液中獲取銅。研究人員已初步分離、篩選到能高效產銅的該菌種，實驗大致步驟如圖所示，請分析回答問題。
(1)分離這種菌種，可在培養基中加入化合物___________，此種培養基屬于__________。
(2)篩選高產菌株時，接種到______培養基(按物理性質劃分)進行培養，篩選高產菌株的方案是：_______________________________________________________________________.
(3)將獲得的高產菌株進行進一步純化培養時，一般用固體培養基，常采用_____法進行接種。
(4)實驗結束時，使用過的培養基應進行滅菌處理才能倒掉，操作時采用_______滅菌方法，這樣做的目的是__________________________________________________________.
5. 〖解析〗由題中所述條件可知：氧化亞鐵硫桿菌能氧化輝銅礦等各種硫化礦獲得能量，并產生硫酸和硫酸鐵，因此分離這種菌種，可在培養基中加入Cu2S，此種培養基屬于選擇培養基。如果篩選此高產菌株，可在液體培養基上培養，測量產銅量。
〖答案〗(1)Cu2S選擇培養基 (2)液體分裝成若干瓶等量培養基，接種等量菌種，在相同培養條件下培養一定時間，測量各瓶中產銅量 (3)平板劃線 (4)高壓蒸汽 防止環境污染
6．有些微生物能合成纖維素酶，通過對這些微生物的研究和應用，使人們能夠利用秸稈等廢棄物生產酒精，用纖維素酶處理服裝面料等。纖維素酶可以通過微生物發酵來生產，為了提高酶的產量，請你設計一個實驗，利用誘變育種的方法，獲得產生纖維素酶較多的菌株。
(1)寫出實驗步驟：
①將培養好的生產菌株分成兩組______________________________________________.
②制備含有___________的固體培養基。
③_________________________________________________________________________.
④__________________________________________________________________________.
(2)預期實驗結果結論：
①__________________________________________________________________________.
②__________________________________________________________________________.
③__________________________________________________________________________.
(3)若獲得純凈的高產菌株，需進行_____________ 或___________________操作。
6. 〖解析〗實驗設計要遵循對照原則和單一變量原則。要利用誘變育種的方法，獲得產生纖維素酶較多的菌株，需一組用一定劑量的誘變劑處理，另一組不處理作對照。鑒定纖維素分解菌用剛果紅染色法。純化菌種可用平板劃線法或稀釋涂布平板法。
〖答案〗（1）①一組用一定劑量的誘變劑處理，另一組不處理作對照。②纖維素 ③把誘變組的大量菌株接種到多個含有纖維素的固體培養基上，同時接種對照組(未處理)的菌株。把它們置于相同的條件下培養④一段時間后，取培養基用剛果紅染色，觀察記錄菌落周圍透明圈的大小情況
(2)①誘變組中菌落周圍的透明圈與對照組相比較大，說明誘變育種獲得了高纖維素酶產量的菌株②誘變組中菌落周圍的透明圈與對照組相同，說明誘變育種沒有使菌株發生相關變化
③誘變組中菌落周圍的透明圈與對照組相比較小，說明誘變育種獲得了低纖維素酶產量的菌株(3)平板劃線 稀釋涂布平板
7．用來判斷選擇培養基是否起到了選擇作用需要設置的對照是 ( )
A．未接種的選擇培養基 B．未接種的牛肉膏蛋白胨培養基
C．接種了的牛肉膏蛋白胨培養基 D．接種了的選擇培養基
7. 〖解析〗對照實驗是指除所控因素外其它條件與被對照實驗完全對等的實驗，判斷選擇培養基是否起到了選擇作用，則接種了的選擇培養基是實驗組，而接種了的牛肉膏蛋白胨培養基屬于對照組。
〖答案〗C
8．某課題小組的研究性學習課題是“探究影響細菌生長繁殖的因素”。他們在培養細菌的過程中發現了某種細菌(記作R)的周圍其他細菌的生長繁殖受到抑制。他們把R細菌接種到專門的培養基上培養，一段時間后除去R細菌，用該培養基再培養其他細菌，結果其他細菌仍然不能生長和繁殖。據以上材料回答下列問題：
(1)從生態學的角度分析，R細菌與其周圍細菌之間的關系______________________。
(2)R細菌周圍的其他細菌不能生長和繁殖的原因最可能是________________________.
(3)為驗證(2)中的原因而進行了如下實驗。請補充相關的實驗步驟及結果：
第一步：取兩個培養皿，按相同營養成分配制成甲、乙兩個培養基：
第二步：________________________________________________________________.
第三步：_________________________________________________________________.
第四步：在相同條件下，讓甲、乙兩個培養基上的細菌生長繁殖。
實驗結果：_________________________________________________________________.
8. 〖解析〗不同種的生物生活在一起，因食物、生存空間等而發生的斗爭屬于競爭；根據題目信息，可能是R細菌產生了不利于其他細菌生存的物質使周圍其他細菌的生長繁殖受到抑制；對于補充完善型的實驗，要注意前后聯系，分析實驗原理，整體設計思路等，然后再進行補充和完善。
〖答案〗(1)競爭 (2)R細菌產生了不利于其他細菌生存的物質 (3)在甲培養上接種R細菌，培養一段時間后，去除細菌；乙培養 基上不接種R細菌作為對照在這兩個培養基上分別接種相同的其他細菌 甲培養基上的細菌不能生長繁殖．乙培養基上的細菌能正常生長繁殖。
9. 不同微生物有各自的代謝特點，人們常據此分離鑒別微生物的種類。實驗室有兩個菌種：胱氨酸依賴型細菌(無胱氨酸不能生長)，甲基營養細菌(只能利用甲醇、甲烷作碳源)，
但試管上標簽脫落。某同學的鑒別思路是配制3個培養基，只接種其中的任一菌種，根據生長狀況將其鑒別出來，另一種自然鑒別出來。請根據這一思路完成實驗方案。
實驗步驟：
第一步：在兩個菌種的試管上分別標記A、B；
第二步：配制不含胱氨酸和甲基營養物的培養基，分別倒入3個培養皿中，標上l、2、3，___________________________________________________________________________。
第三步：___________________________________________________________________。
結果分析：_________________________________________________________________。
和其他微生物的培養一樣，第二步和第三步中都應注意_______操作，否則將導致實驗失敗。
9.〖解析〗題干給出了兩個菌種的代謝特點，要對其進行分離，需人為創造兩菌種各自所需要的生長發育條件，即設計選擇培養基，本實驗屬于探究性實驗，結果分析需分情況討論。
〖答案〗第二步：在1號培養皿中加入適量胱氨酸；在2號培養皿中加入適量甲基營養物(甲醇、甲烷)；3號作為對照，一起滅菌
第三步：將A菌(或B菌)接種于1、2、3號培養皿中，適宜條件下培養數天，觀察細菌生長狀況
結果分析：①若接種的A菌在1號培養皿中能生長，在2、3號培養皿中不能生長，則A菌為胱氨酸依賴型細菌，B菌為甲基營養細菌；②若接種的A菌在2號培養皿中能生長，在1、3號培養皿中不能生長，則A菌為甲基營養細菌，B菌為胱氨酸依賴型細菌
(①若接種的B菌在1號培養皿中能生長，在2、3號培養皿中不能生長，則B菌為胱氨酸依賴型細菌，A菌為甲基營養細菌；②若接種的B菌在2號培養皿中能生長，在1、3號培養皿中不能生長，則B菌為甲基營養細菌，A菌為胱氨酸依賴型細菌。) 無菌
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